Ifølge ESPN, som er en av verdens største sportskanaler, vil Major League suspendere 20 spillere den kommende uken for bruk av prestasjonsfremmede midler.
Det skal være den verste dopingskandalen i amerikansk historie.
Spillerne skal være tilknyttet en klinikk i Miami-området, og stjernespillere som Alex Rodriguez og Ryan Braun blir navngitt.
Begge har tidligere nektet for å ha dopet seg.
Klinikk-eier samarbeider
Major League ønsker ikke å kommentere informasjonen overfor ESPN eller CNN, men forbundet bekrefter at en etterforskning er igangsatt.
Tony Bosch er grunnlegger av Biogenesis of America-klinikken, som blir anklaget for å ha gitt spillerne dopingmidler.
Han velger å samarbeide med etterforskerne, men Bosch nekter samtidig for anklagene.
– Jeg har blitt anklaget og dømt i media, og jeg mener jeg har blitt utsatt for falske anklager hele veien. Jeg har ikke gjort noe galt, sier Bosch til ESPN.
Nå skal Bosch brukes til å bekrefte hvilke spillere som har dopet seg, ifølge nyhetskanalen. Han skal ha godtatt å gi fra seg all informasjon etterforskerne trenger.
Koblet til tidligere dopingsak
Dopingopprullingen skal ha begynt allerede sommeren 2012, da tre baseballspillere ble utestengt i 50 kamper for bruk av testosteron, skriver ESPN.
De tre spillerne var tilknyttet Miami-området, og Bosch sin klinikk havnet under lupen.
Ifølge ESPN fant etterforskere flere dokumenter som koblet klinikken til Braun, blant annet gjeldspapirer på titusenvis av kroner.
Både Braun og Bosch hevder at pengene kun er brukt til å betale for rådgivning etter at baseballspilleren testet positivt for testosteron i 2011.
– Jeg har allerede forklart hva som skjedde. Jeg vil ikke gi noen flere kommentarer til Miami-situasjonen, sa Braun til USA Today tirsdag kveld.
– Alltid bekymret
Brewers-spiller Braun ble først utestengt i 2012 for å ha testet positivt på testosteron i oktober 2011, men Braun anket og ble renvasket for testosteron-bruk neste dag.
Yankees-spiller Alex Rodriguez, Major Leagues best betalte spiller, har flere ganger vært anklaget for dopingbruk.
– Jeg er alltid bekymret for spillerne mine. En ting du aldri vil glemme, er at de bare er mennesker, sa Yankees-trener Joe Girardi til CNN tirsdag.
Heller ikke Brewers-trener Ron Roenicke ønsker å kommentere anklagene i detalj.
– Jeg vet at Major League håndterer det. Det er alt jeg vet, sa Roenicke.
De involverte spillerne risikerer å bli utestengt i 100 kamper.